魚粉是一種重要的蛋白質原料，其安全性問題不能忽略，安全重要體現在是否有藥物殘留、是否有毒物質殘留等，具體可操作的檢測指標包括魚粉的新鮮度、藥物殘留和衛生指標等。魚粉的新鮮度差，會嚴重降低魚粉是品質，甚至喪失飼用價值。本文著重討論其中的一項鑒定指標進行檢測應用，以揮發性鹽基氮含量表示。
揮發性鹽基氮是指動物性食物由于酶和細菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質分解而產生氨以及胺類含氮物質，此類物質具有揮發性，在堿性溶液中蒸出后，用標準酸液滴定從而計算含量，根據此原理，在半微量檢測方法的基礎上改良，使檢測更簡易、快捷。
1、試劑
1.1 1%氧化鎂混懸液 分析純氧化鎂1.0g溶于100ml蒸餾水中，振搖成混懸液。
1.2 2%硼酸吸收液 分析純硼酸2g溶于100ml蒸餾水。
1.3 0.1mol/L鹽酸標準液 吸取分析純鹽酸8.3ml，用蒸餾水定容至1000ml，用無水碳酸鈉標定。
1.4 0.01ml/L鹽酸標準液 用0.1mol/L鹽酸標準溶液稀釋。
1.5 混合指示劑 甲基紅0.1%乙醇溶液，溴甲酚綠0.5%乙醇溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存三個月以內。
二。實驗所用到的儀器
2.1 上海梅穎浦磁力攪拌器
2.2 型定氮儀
2.3 離心機
2.4 消化管
2.5 滴定管 zui小分度0.01ml
3、分析步驟
3.1 樣品處理
取10g魚粉于250ml錐形瓶中，加100ml(V總)蒸餾水，于磁力攪拌器上攪拌30min，4000轉離心。
3.2 蒸餾滴定
吸取20.0ml2%硼酸吸收液于錐形瓶中，加混合指示劑2~3滴，使KDN-2C型定氮儀的冷凝管末端浸入此溶液。準確吸取10.0ml(V分)上述樣品清夜于消化管中，加少量蒸餾水沖洗，再加入10ml1%的氧化鎂溶液，蒸餾至150ml(約5min)。吸收液立即用0.01mol/L鹽酸標準溶液滴定，溶液由藍綠色變為灰紅色為終點，同時做試劑空白。
4、計算
揮發性鹽基氮(W)以每100g樣品含氮毫克數表示。
W—樣品中揮發性鹽基氮的含量，mg/100g
V1—測定試樣所消耗鹽酸標準溶液體積，ml
V2—試劑空白消耗鹽酸標準溶液體積,ml
C—鹽酸標準溶液的實際濃度，mol/L
14—與1.00mL標準標準滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]相當的氮的質量，mg
m—樣品質量，g
結果的表述：報告算術平均值的三位有效數。
5、允許差
相對誤差≤10%。
6、影響因素
6.1 時間
VBN的檢測反映的是魚粉的腐敗過程所產生的氨以及胺類等堿性含氮物質，因此，離心后的樣液應馬上檢測。作者以粗蛋白含量為65%的進口秘魯魚粉為例，對比時間對VBN的影響(見表1)。
表1 時間對VBN的影響
時間 VBN(mg/100g)
2h 175
1h 158
0.5h 133
10min 112
5min 106
3min 105
以上表明，試液應在5min以內進行測定。
6.2 溫度
磁力攪拌過程也要維持一定的溫度，溫度越高，VBN越大，檢驗的誤差越大。
表2 溫度對VBN的影響
溫度 VBN(mg/100g)
20℃ 105
25℃ 108
30℃ 122
32℃ 154
以上表明，磁力攪拌中控制溫度在20~25℃*。
7、其他
7.1 魚粉執行質量標準(魚粉GB T19164-2003)的主要技術參數(表3)
表3 魚粉GB T19164-2003
項目 指標
特級品 一級品 二級品 三級品
粗蛋白(%) ≥65 ≥60 ≥55 ≥50
揮發性鹽基氮VBN(mg/100g) ≤110 ≤130 ≤150 ≤150
7.2 本檢測方法可推廣應用至其他的動物性蛋白飼料，例如血漿蛋白、血球蛋白等等。
